Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次经常造出现肝细胞自身病原本体到经常造出现1同型肝炎临床研究者副作用的成果率在孩童时期就有很好的阐述，多个肝细胞自身病原本体非典同型的孩童；还有70%在人本体内转换后10天内患上肝炎，而随访15年的孩童这一%-减小到84%。比起之下，占临床研究者1同型肝炎一半以上的同型1同型肝炎的患病机制还没有人获得充分的研究者。

非常多的人开始应用于应于系统来并不一定1同型肝炎的成果：个本体在经常造出现多种肝细胞自身病原本体时离开第1收尾，经常造出现皮质醇所致时离开第2收尾，经常造出现副作用时离开第3收尾。一些多发肝细胞自身病原本体非典同型的个本体，在1期和2期，成果较慢，并发展为患病的1同型肝炎。我们以前阐述了一四组在首次探测到多种肝细胞自身病原本体样本后大概10年无肝炎的正因如此慢成果者，这四组病征人数寡，但形态非常明确。随后，我们推测肝细胞自身蛋白质免疫CD8+T细胞内化学反应在成果平稳的病征中所基本不存在，但在近期患病和值得注意的肝炎病征中所很非常容易探测到。这意味著暗示，与成果病征比起，这些病征自身免疫化学反应的缓冲加强。

早期研究者暗示，尽管缓冲性T细胞内(Treg)数量正常，但肝炎病征存在一些功能缺陷，其中所仅限于对IL-2的化学反应潜能减小。此外，肝炎病征中所的现像CD4+T细胞内意味著对缓冲非常具抵抗性，展现出为现像T细胞内的诱发消退，自然归因于的Treg和本体内归因于的可借Treg，以及蛋白质经历的CD4+T细胞内中所IL-2化学反应消退。本研究者的目标是阐述了CD4+缓冲性T细胞内(Treg)在一小群正因如此平稳成果者中所的形态，他们的平均比率为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX研究者是一项以青年人为了将的纵向研究者，在21岁以下住院的病征直系亲属中所检查1同型肝炎的凶险因素。我们以前阐述了长期平稳成果者的形态，他们保持一致多重肝细胞自身病原本体非典同型大约10年，但没有人经常造出现肝炎的临床研究者副作用，慢性或非透过性自身免疫。随后，10名继续保持一致无肝炎并愿意提供大量血液样本的平稳成果者纳入T和B细胞内功能统计分析。在目前为止的研究者中所，8名慢成果者(SP四组)，中所位比率43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的肝细胞自身病原本体非典同型。所有的参加者都属于1同型肝炎成果的1期，尽管一些人随后失去了肝细胞自身病原本体对某些蛋白质的非典同型化学反应，然而，一名病征已经属于2期大概6年，但没有人经常造出现临床研究者副作用，一名病征被诊断为肝炎，该病患72岁，在采集物理样本时，其HbA1c下降时到53 mmol/mol(7%)，在数据统计分析中所对该供本体透过了单独评量。分离外周血单个核反应细胞内(PBMCs)，采用多最简单流式细胞内练成和T细胞内诱发试验评量供本体中所Treg的高频率、表同型和功能。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类确认、表征和转回)透过无监督聚类统计分析，评量Treg表同型。

结果：与生活品质供本体比起，来自慢成果本体的梦境CD4+T细胞内的监督聚类暗示，激活的梦境CD4+ Treg高频率减小，与糖皮质激素可借的TNFR相关细胞内(GITR)解读减小有关。一名HbA1c下降时的病征与成果平稳者和最简单的对照四组比起，Treg谱有所相同。功能统计分析暗示，与生活品质供本体比起，来自平稳成果本体的Treg酪氨酸的CD4+现像T细胞内诱发明显受损。展现出为对现像CD4+T细胞内CD25和CD134解读的诱发减小。

布1 深入的表同型统计分析暗示，CD4+Treg亚同型在慢成果描述符中所减小。由FlowSOM分解的Treg会议室，聚集在来自所有供本体的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据记号物解读确认造出10个元簇:梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)应用于9个相同Treg记号分解的10个元簇的MST。每个终端代表一个战略性(100个战略性)，非常大的元战略性(10个元战略性)在终端四组周围剪裁。每个终端中所的糕布回应单个记号的解读级别。(b)每个元聚类的热布，以暗示主本体记号解读。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)分解布，以及FlowSOM辨别的每个元簇的沙质。(e-l)比较原子量为每个metacluster罐中所央线布(原子量> 0.05%)确定为HD和SP四组:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞内(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞内(l)。蓝色左上方代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon一组小写字母秩检验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 应用于CITRUS的预测模同型猜测，Treg高频率的减小是成果平稳的徽标。评定依赖同型(a - f)和柑橘统计分析(g-k)比较SP参加者和最简单的HD参加者在CD4+CD45RA−T细胞内上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的别具特色布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR解读透过分离，模拟FlowSOM群本体。(b) HD(黑点)和SP(虎纹)四组以及供本体SP 606(蓝色)中所CD25+ cd127的高频率统计布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖同型长空集的罐中所央线布;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)棉花簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3解读强度着色，上标突造出的簇被辨别为SP和HD描述符间的相同。(j)罐中所央线布暗示了在SP(虎纹)和HD(灰点)四组中所，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的比较原子量(%-)。(k)直方布暗示每个簇的表同型(紫色)和Treg记号比较解读与取材解读(金色);上列，缓存Treg_3;后面一行，缓存Treg_4。取材与所有其他簇中所记号的解读有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon一组小写字母秩检验

布3 与生活品质献血者比起，成果平稳者梦境treg的GITR减小。每个梦境CD4+T细胞内元簇(梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个解读记号的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的解读热布(sp606不仅限于在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中所所有HD(黑色)、所有SP(金色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR解读相联，暗示直方布(c)和统计布(d)。Wilcoxon一组小写字母秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有供本体仅限于，p< 0.05(金色)供本体SP 606和最简单的HD不仅限于在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR解读，从评定依赖同型，从所有HD(黑色)、所有SP(金色)和SP 606(蓝色)相联，暗示直方布(e)和统计布(f) *p< 0.05, Wilcoxon一组小写字母秩检验

布4 来自平稳成果的CD4+ treg细胞内控制现像CD4+T细胞内的潜能减小。SP四组用金色的中所央线和左上方回应，HD四组用黑色的中所央线和左上方回应，蓝色的中所央线/左上方回应供本体sp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被记号为CFSE, Treg按仔细观察的%-滴定。用抗CD3 /28微珠增殖细胞内，培育3翌日透过流式细胞内练成探测。(a-d)与CD4+需要的话者比较应的treg培育(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者培育。(a,b,f) CFSE再生(a,e)和CFSE诱发%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发%-。应用于非典同型对照(激活的响应细胞内不含treg)计算诱发%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 现像CD4+T细胞内对平稳成果的T细胞内增殖的诱发非常适合于。SP四组用金色的中所央线和左上方回应，HD四组用黑色的中所央线和左上方回应，蓝色的中所央线/左上方回应供本体sp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel记号，treg按仔细观察的%-滴定。用抗CD3 /28微珠增殖细胞内，培育3翌日透过流式细胞内练成(CD25反染)和细胞内因长子统计分析。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同培育。(a,b) CFSE再生(a)和CFSE诱发三份(b)。(c,d) CD25诱发三份(c)和CD134诱发三份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培育中所的解读。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们得造出的事实是，来自平稳成果长子的增殖梦境CD4+Treg在GITR解读中所获得了扩张和丰富，强调了大幅度研究者Treg在1同型肝炎风险个本体中所的一般而言的重要性。

中文翻译造典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28